Evaluación del método de enfriamiento en dos pasos como eutanasia asistida en juveniles de Penaeus vannamei
Resumen
Este estudio evaluó el impacto del manejo previo y el método de eutanasia por enfriamiento rápido en dos pasos sobre el bienestar de juveniles tempranos del camarón blanco del Pacífico (Penaeus vannamei). La investigación se centró en identificar alteraciones externas e internas asociadas al estrés fisiológico en organismos sometidos a diferentes densidades de cultivo: baja (1/2 L), media (10/20 L) y alta (30/20 L), durante un periodo de 72 horas antes de aplicar el procedimiento de eutanasia asistida. El protocolo consistió en exponer los camarones a una toalla fría (2°C) hasta inducir un estado de hipoactividad, seguido de inmersión en agua a la misma temperatura. Se utilizaron como confirmación de eutanasia indicadores como la opacidad muscular, inmovilidad de dendrobranquias y ausencia de movimiento del escafognatito. Los resultados mostraron que solo en la condición de alta densidad los camarones presentaron signos externos evidentes de estrés (opacidad muscular, antenas rojas, letargia y mortalidad parcial). En contraste, los tratamientos de baja y media densidad no evidenciaron deterioro significativo del bienestar, tanto en observaciones externas como en análisis inmunológicos y antioxidantes (hemocitos, SOD, GPx, CAT). La evaluación estadística mediante PCA y PERMANOVA no reveló diferencias significativas en los biomarcadores internos entre densidades baja y media. Asimismo, el Índice de Estrés Fisiológico no presentó variaciones estadísticamente significativas entre estos grupos. Los hallazgos respaldan el uso del enfriamiento rápido en dos pasos como método eficaz, humanitario y científicamente válido para la eutanasia de juveniles de P. vannamei, bajo condiciones de laboratorio. Además, se sugiere que densidades de hasta 10 individuos·L-¹ no comprometen el bienestar fisiológico de los organismos, lo que permite su uso en experimentación sin inducir estrés medible.
Descargas
Citas
Organización de las Naciones Unidas para la Alimentación y la Agricultura (FAO). El estado mundial de la pesca y la acuicultura [Internet]. Roma (Italia): El estado mundial de la pesca y la acuicultura 2024. 2025 [consultado 12 Jun. 2025]; p. 278. doi: https://doi.org/p87c
Leano EM, Lavilla–Pitogo CR, Paner MG. Bacterial flora in the hepatopancreas of pond– reared Penaeus monodon juveniles with luminous vibriosis. Aquaculture [Internet].1988; 164(1– 4):367–374. doi: https://doi.org/dnxj3s DOI: https://doi.org/10.1016/S0044-8486(98)00201-4
Santiago M, Espinosa A, Bermúdez M. Uso de antibióticos en la camaronicultura. Rev. Mex. Cienc. Farmac. [Internet]. 2009 [consultado 12 Jun. 2025]; 40(3):22–32. Disponible en: https://goo.su/zcfmjE
Boada–Saña M, Colom–Comí A, Castelló–Echeverria N. La experimentación animal. [Internet]. 2012 [consultado 13 Jun 2025]; 1–202. Disponible en: https://goo.su/ovoVc4N
Hernández–Luna PV, Ruiz–Zermeño AA, Saldaña–Pérez L, Romero–Mata JT, García–Munguía CA, Hernández AA. Importancia de factores relacionados con el bienestar animal para animales de experimentación. Tem. Selec. Vet. Zootec. [Internet]. 2022; 14:1–13. doi: https://doi.org/p87d DOI: https://doi.org/10.15174/jc.2022.3473
Garcés–Giraldo LF, Giraldo–Zuluaga C. Bioética en la experimentación científica con animales: cuestión de reglamentación o de actitud humana. Rev. Lasallista Investig. [Internet]. 2012 [Consultado 15 de Jun 2025]; 9(1):159–166. Disponible en: https://goo.su/3mXVz9
Tucker SM, Balko JA, Smith DC, Minter LJ, Houck EL. Investigation of euthanasia techniques in four species of cockroaches. PeerJ. [Internet]. 2023; 11:e16199. doi: https://doi.org/p87f DOI: https://doi.org/10.7717/peerj.16199
Drinkwater E, Robinson EJH, Hart AG. Keeping invertebrate research ethical in a landscape of shifting public opinion. Methods Ecol. Evol. [Internet]. 2019; 10(8):1265–1273. doi: https://doi.org/gjs8mj DOI: https://doi.org/10.1111/2041-210X.13208
Elwood RW. Evidence for pain in decapod crustaceans. Anim. Welf. [Internet]. 2012; 21(S2):23–27. doi: https://doi.org/f32hcp DOI: https://doi.org/10.7120/096272812X13353700593365
American Veterinary Medical Association (AVMA). AVMA Guidelines for the euthanasia of animals: 2020 Edition [Internet]. Schaumburg (IL, USA): AVMA. 2020 [consultado 15 Jun 2025]; 121 p. Disponible en: https://goo.su/x0o2kS
Braun ME, Heatley JJ, Chitty J. Clinical techniques of invertebrates. Vet. Clin. N. Am. Exot. Anim. Pract. [Internet]. 2006; 9(2):205–221. doi: https://doi.org/bh78fn DOI: https://doi.org/10.1016/j.cvex.2006.02.001
Cooper JE. Anesthesia, analgesia, and euthanasia of invertebrates. ILAR J. [Internet]. 2011; 52(2):196–204. doi: https://doi.org/gnpnmp DOI: https://doi.org/10.1093/ilar.52.2.196
Conte F, Voslarova E, Vecerek V, Elwood RW, Coluccio P, Pugliese M, Passantino A. Humane slaughter of edible decapod crustaceans. Animals [Internet]. 2021; 11(4):1089. doi: https://doi.org/p87g DOI: https://doi.org/10.3390/ani11041089
Secretaría de Agricultura, Ganadería, Desarrollo Rural, Pesca y Alimentación. NORMA Oficial Mexicana NOM–062– ZOO–1999, Especificaciones técnicas para la producción, cuidado y uso de los animales de laboratorio. DIARIO OFICIAL [Internet]. 2001 [consultado 13 Jun 2025]; 107–165. Disponible en: https://goo.su/gTRYD
Ramírez–Azpilcueta BA, García–Aguilar N, Puello–Cruz AC, Bolán– Mejía MC, Gómez–Gil B, Osuna–Ruiz I, Morales–Covarrubias MS. Therapeutic, histopathological, and non–specific immune status effect of Rhizophora mangle and Laguncularia racemose hydroalcoholic extract against Vibrio harveyi and Vibrio campbellii in white shrimp (Penaeus vannamei). Lat. Am. J. Aquat. Res. [Internet]. 2023; 51(4): 543–555. doi: https://doi.org/p87h DOI: https://doi.org/10.3856/vol51-issue4-fulltext-3051
Morales–Covarrubias MS. Enfermedades del camarón: Detección mediante análisis en fresco e histopatología. 2da ed. Ciudad de México (México): Editorial Trillas; 2010.
Lightner D. A handbook of shrimp pathology and Diagnostic procedures for diseases of cultured penaeid shrimp. Louisiana (USA): World Aquaculture Society; 1996.
Martínez–Yáñez R, Mora–Medina P, Albertos–Alpuche PJ. EPI–DOM approach for comprehensive assessment of integral animal welfare. Front. Anim. Sci. [Internet]. 2025; 6:1495149. doi: https://doi.org/p87k DOI: https://doi.org/10.3389/fanim.2025.1495149
Le Moullac G, Le Groumellec M, Ansquer D, Froissard S, Levy P, AQUACOP. Haematological and phenoloxidase activity changes in the shrimp Penaeus stylirostris in relation with the moult cycle: protection against vibriosis. Fish Shellfish Immunol. [Internet]. 1997; 7(3):227–234. doi: https://doi.org/b4dqm2 DOI: https://doi.org/10.1006/fsim.1996.0077
Chen YY, Kitikiew S, Yeh ST, Chen JC. White shrimp Litopenaeus vannamei that have received fucoidan exhibit a defense against Vibrio alginolyticus and WSSV despite their recovery of immune parameters to background levels. Fish Shellfish Immunol. [Internet]. 2016; 59:414–426. doi: https://doi.org/p87n DOI: https://doi.org/10.1016/j.fsi.2016.10.050
Hurlbert SH. Pseudoreplication and the design of ecological field experiments. Ecol. Monogr. [Internet]. 1984; 54(2):187–211. doi: https://doi.org/c37ccj DOI: https://doi.org/10.2307/1942661
Zuur AF, Ieno EN, Walker NJ, Saveliev AA, Smith GM. Mixed effects models and extensions in ecology with R. Nueva York (USA): Springer; 2009. DOI: https://doi.org/10.1007/978-0-387-87458-6
Segnini SE. Fundamentos de Bioestadística. Mérida (Venezuela): Universidad de los Andes; 2004.
Johnson RA, Wichern DW. Applied Multivariate Statistical Analysis. 5ta. ed. Nueva Jersey (USA): Prentice Hall; 2002.
Anderson MJ. A new method for non–parametric multivariate analysis of variance. Austral Ecol. [Internet]. 2001; 26(1):32–46. doi: https://doi.org/cdwcns DOI: https://doi.org/10.1046/j.1442-9993.2001.01070.x
Dunn JC, Cole EF, Quinn JL. Personality and parasites: sex– dependent associations between avian malaria infection and multiple behavioural traits. Behav. Ecol. Sociobiol. [Internet]. 2011; 65:1459–1471. doi: https://doi.org/fsbchk DOI: https://doi.org/10.1007/s00265-011-1156-8
Ruxton GD. The unequal variance t–test is an underused alternative to Student’s t–test and the Mann–Whitney U test. Behav. Ecol. [Internet]. 2006. 17(4): 688–690. doi: https://doi.org/bwgs7v DOI: https://doi.org/10.1093/beheco/ark016
Brock J, Main KL. A guide to the common problems and diseases of cultured “Penaeus vannamei”. Louisiana (USA): World Aquaculture Society; 1994.
Lightner DV, Redman RM. Shrimp diseases and current diagnostic methods. Aquaculture 1998; 164(1–4):201–220. doi: https://doi.org/c3pxk9 DOI: https://doi.org/10.1016/S0044-8486(98)00187-2
Kotiya AS, Vadher KH. Effect of diffeent stocking density on growth and survival of Litopenaeus vannamei (Boone, 1931) in summer crop in province of Gujarat State, India. J. Exp. Zool. India. [Internet]. 2021; 24:261–275. Disponible en: https://goo.su/hsFtL
Royal Society for the Prevention of Cruelty to Animals. Responding to the government’s consultation on health and harmony: The future for food, farming and the environment in Green Brexit. Horsham (UK): Royal Society for the Prevention of Cruelty to Animals; 2018 [consultado 15 Jun 2025]. Disponible en: https://goo.su/lB2FUSZ
Ríos M, Corrales–Barrios Y, González–Salotén M, Carrillo– Farnés O, Cabrera–Alarcón H, Arenal–Cruz A. Principales factores que modifican el sistema inmune en camarones peneidos estrategias para un cultivo sostenible. Rev. Prod. Anim. [Internet]. 2022 [consultado 15 Jun 2025]; 34(1):e4037. Disponible en: https://goo.su/kn2Id
Dong J, Zhao YY, Yu YH, Sun N, Li YD, Wei H, Yang ZQ, Li XD, Li L. Effect of stocking density on growth performance, digestive enzyme activities, and nonspecific immune parameters of Palaemonetes sinensis. Fish Shellfish Immunol. [Internet]. 2018; 73:37–41. doi: https://doi.org/gc3pw2 DOI: https://doi.org/10.1016/j.fsi.2017.12.006
Gao Y, He Z, Zhao B, Li Z, He J, Lee, J, Chu Z. Effect of stocking density on growth, oxidative stress and HSP 70 of pacific white shrimp Litopenaeus vannamei. Turk. J. Fish. Aquat. Sci. [Internet]. 2017; 17(5):877–884. doi: https://doi.org/p87s DOI: https://doi.org/10.4194/1303-2712-v17_5_04
Kotiya AS, Vadher KH. Effect of different stocking density on growth, survival on Litopenaeus vannamei (Boone, 1931) in summer and monsoon crop in province of Gujarat States in India. J. Surv. Fish. Sci. [Internet]. 2021 [consultado 3 Jun 2025]; 7(3):71–99. Available in: https://goo.su/lg8G9 DOI: https://doi.org/10.18331/SFS2021.7.3.7
Liu KF, Chiu CH, Shiu YL, Cheng W, Liu CH. Effects of the probiotic, Bacillus subtilis E20, on the survival, development, stress tolerance, and immune status of white shrimp, Litopenaeus vannamei larvae. Fish Shellfish Immunol. [Internet]. 2010; 28(5–6):837 – 844. doi: https://doi.org/b2bkmd DOI: https://doi.org/10.1016/j.fsi.2010.01.012
Anaya–Rosas RE, Rivas–Vega EM, Miranda–Baeza A, Piña– Valdez P, Nieves–Soto M. Effects of a co–culture of marine algae and shrimp (Litopenaeus vannamei) on the growth, survival and immune response of shrimp infected with Vibrio parahaemolyticus and white spot virus (WSSV). Fish Shellfish Immunol. [Internet]. 2019; 87:136–143. doi: https://doi.org/p87w DOI: https://doi.org/10.1016/j.fsi.2018.12.071
Luna–González A, Moreno–Herrera JT, Campa–Córdova AI, González–Ocampo HA, Fierro–Coronado JA, Álvarez–Ruíz P, Bueno–Ibarra MA. Respuesta inmune y expresión de genes en el camarón blanco (Litopenaeus vannamei) inducida por inmunoestimulantes microbianos. Lat. Am. J. Aquat. Res. [Internet]. 2013; 41(5):898–907. doi: https://doi.org/p87x DOI: https://doi.org/10.3856/vol41-issue5-fulltext-10
